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內(nèi)脂素(Visfatin)ELISA試劑盒如何使用?

更新時(shí)間:2023-04-12 瀏覽次數(shù):403

  內(nèi)脂素(Visfatin)ELISA試劑盒是一種專為測(cè)定內(nèi)脂素水平而設(shè)計(jì)的試劑盒,使用ELISA技術(shù),通過(guò)檢測(cè)標(biāo)本中的內(nèi)脂素與試劑盒中的特異性抗體結(jié)合的程度,來(lái)量化內(nèi)脂素的濃度。
 
  內(nèi)脂素(Visfatin)ELISA試劑盒的使用方法:
 
  一、試劑盒的準(zhǔn)備
 
  首先要準(zhǔn)備好內(nèi)脂素ELISA試劑盒,并保持試劑盒內(nèi)各組分的完整性,確保試劑盒的質(zhì)量。同時(shí),要在試劑準(zhǔn)備前將冰箱溫度恢復(fù)到4℃以下,并將冷藏試劑和凍干試劑先放在室溫下化解和恢復(fù)。
 
  二、標(biāo)本收集與處理
 
  標(biāo)本采集要采用專用的采血管或采血器,如EDTA抗凝血管等,并確保樣本接觸空氣的時(shí)間盡量縮短。采集的標(biāo)本應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)離心分離清除血細(xì)胞,收集上清液并儲(chǔ)存成小分裝,迅速置于-80℃或液氮保存,不可重復(fù)凍融。
 
  三、試劑的稀釋
 
  根據(jù)不同的樣本種類確定需要稀釋的試劑,將稀釋好的試劑準(zhǔn)備好,并放在準(zhǔn)備好的試劑管中,保證稀釋液的穩(wěn)定性和一致性。
 
  四、裝板操作
 
  將準(zhǔn)備好的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加入到各快板微孔中,一定要按照試劑盒說(shuō)明書中的規(guī)定加樣,否則會(huì)影響最終的結(jié)果,并將加入標(biāo)本的玻璃紙進(jìn)行標(biāo)記。加樣完畢后,將微孔板封閉,進(jìn)行震蕩和旋轉(zhuǎn)半小時(shí),以保證標(biāo)本中的內(nèi)脂素與特異性抗體結(jié)合。
 
  五、發(fā)色反應(yīng)
 
  將孔板中的樣本液倒掉,用洗板液洗板三次,以清洗掉微孔板內(nèi)的雜質(zhì),并在板上每個(gè)孔口滴加適量的發(fā)色液,分別進(jìn)行震蕩和旋轉(zhuǎn)。發(fā)色時(shí)間一般為15-20min,根據(jù)試劑盒說(shuō)明書中的規(guī)定記時(shí)。發(fā)色結(jié)束后,停止發(fā)色反應(yīng),加入停色液,并進(jìn)行震蕩和旋轉(zhuǎn),停止反應(yīng)。
 
  六、檢測(cè)結(jié)果的測(cè)定和記錄
 
  通過(guò)讀板儀檢測(cè)不同孔口的發(fā)色結(jié)果,測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)品及樣本的OD值,并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算,得到相應(yīng)的內(nèi)脂素濃度。最后將結(jié)果記錄下來(lái),以便后續(xù)的數(shù)據(jù)分析和繪制。
 
  綜上所述,內(nèi)脂素ELISA試劑盒是一種很常用的檢測(cè)內(nèi)脂素濃度的試劑盒,可廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、臨床實(shí)驗(yàn)室及科研領(lǐng)域。在使用該試劑盒時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的規(guī)定進(jìn)行準(zhǔn)備試劑、收集樣本、稀釋試劑、裝板操作和結(jié)果測(cè)定等步驟,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
 

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